A fortaleza de Santa Cruz localiza-se na cidade de Niterói, na entrada da banda oriental da baía de Guanabara. Junto com a fortaleza de São João - localizada na banda ocidental da baía, no bairro da Urca - e o forte Tamandaré da Lage - localizado na ilha da Lage, na entrada da baía -, a Fortaleza de Santa Cruz teve papel fundamental na defesa da baía de Guanabara e das cidades que a margeam. Em 1584 os portugueses ocuparam a região fundando uma bateria chamada de Nossa Senhora da Guia, que foi responsável pelo repelimento de uma esquadra neerlandesa em 1599, sob o comando do almirante Olivier van Noort, que buscava suprimentos e água potável. Em 1612 foi denominada de fortaleza de Santa Cruz da Barra por ordem do rei Felipe III de Espanha